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第五节 重组DNA分子导入大肠杆菌.ppt

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第五节 重组DNA分子导入大肠杆菌.ppt课件简介: 第五节重组DNA分子导入大肠杆菌DNA分子只有存在活细胞中,生命的特征才展示大肠杆菌是目前最成熟的受体系统。从遗传学的角度来说,遗传物质的转移有转化、转导、转染和接合等主要的方式。DNA转入大肠杆菌主要是通过转化来完成。噬菌体感染宿主细胞时涉及转导和转染的过程。转化(transformation):一种细菌菌株由于捕获了外源DNA导致性状特征发生遗传改变的生命过程。转化在细菌中是一种普遍的现象。细菌能够从周围环境中吸收DNA分子进行转化的生理状态供体DNA与受体细胞特异结合位点结合,达到饱和时开始摄取外源DNA只有一条DNA单链进入细胞(单链摄入),另一条链在膜上降解。单链的转化DNA与受体DNA对应位点的置换,从而稳定地掺入到受体DNA中的过程。受体细胞(receptorcell)又称为宿主细胞或寄主细胞(hostcell)等,从实验技术上讲是能摄取外源DNA并使其稳定维持的细胞;从实验目的上讲是有应用价值和理论研究价值的细胞。●感受态(competence)细胞处于能够吸收DNA的状态,称为感受态。●感受态细胞(competencecell)处于能够吸收DNA状态的细胞,细胞膜的通透性发生变化,成为能容许外源DNA的载体分子通过。转化子(transformant):经转化获得外源遗传物质的细胞。感受态的建立感受态主要受一类蛋白质(感受态因子)影响,感受态因子可以在细菌间进行转移,从感受态细菌中传递到非感受态细菌中,可以使后者变为感受态。一般认为感受态出现在细菌对数生长后期,并且某些处理过程可以诱导或加强感受态,以大肠杆菌为例,用Ca2+(如CaCl2)处理对数生长后期的大肠杆菌可以增强其感受能力。肺炎双球菌中存在感受态...
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