核酸抽取及杂交.ppt

核酸抽取及杂交.ppt课件简介: 核酸抽取及杂交第一部分第一部分DNADNA提提取总论取总论一、提取一、提取DNADNA总的原则：总的原则：11保证核酸一级结构的完整性；保证核酸一级结构的完整性；22其他生物大分子如蛋白质、多糖和脂类分子其他生物大分子如蛋白质、多糖和脂类分子的污染应降低到最低程度；的污染应降低到最低程度；33核酸样品中不应存在对酶有抑制作用的有机溶核酸样品中不应存在对酶有抑制作用的有机溶剂和过高浓度的金属离子；剂和过高浓度的金属离子；44其他核酸分子，如其他核酸分子，如RNARNA，，也应尽量去除。也应尽量去除。二、样本来源：二、样本来源：理论上所有有核真核细胞、细菌、病毒都理论上所有有核真核细胞、细菌、病毒都可以提取可以提取DNADNA样本选择取决于样本选择取决于试验目的试验目的全血是基因组提取最常见的样本全血是基因组提取最常见的样本血清、血浆、外周血有核细胞、痰液、体血清、血浆、外周血有核细胞、痰液、体液、棉拭子采集的各种分泌物、组织（包液、棉拭子采集的各种分泌物、组织（包括骨髓）和羊水等都是分子诊断的检验材括骨髓）和羊水等都是分子诊断的检验材料，其中全血、血浆（血清）标本占分子料，其中全血、血浆（血清）标本占分子诊断的诊断的60%60%以上以上DNADNA提取前样本采集、预处理和保存：提取前样本采集、预处理和保存：（一）全血（一）全血1.1.抗凝剂抗凝剂EDTA-Na2EDTA-Na2或枸橼酸钠或枸橼酸钠作为抗凝剂作为抗凝剂不宜使用肝素不宜使用肝素抗凝剂处理血抗凝剂处理血肝素肝素柠檬酸柠檬酸EDTAEDTA-80-80℃℃保存保存22个月，第个月，第1010天收率天收率90%90%44℃℃第四天收率第...

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